Page 26 - ALAC 2024

Abstract Trabajo/ Premio Simposio ALAC 140
Optimización de la

coloración Papanicolaou

para muestras de semen

y validación

de una nueva técnica

Affranchino Sebastian¹, Caglieris María Luz¹, Uncal Julio²
¹ Nanni Laboratorios, Paraná, Entre Ríos (lcaglieris@labnanni.com.ar)

² Laboratorio de Anatomía Patológica
El factor masculino contribuye en el 30-50% de Confeccionamos dos frotis en portaobjetos
los casos de infertilidad. Está demostrado que la con 50 μL de cada muestra seminal, uno se
morfología espermática (ME) anormal se asocia tiñó en el laboratorio de Anatomía Patológica
con menores tasas de fecundación, clivaje e im- del Dr. Uncal Julio, siguiendo los pasos descri-
plantación embrionaria. Para la evaluación de la tos para la TPAP (grupo 1) y el otro lo colorea-
ME es importante contar con técnicas de tinción mos siguiendo el protocolo para una TOPAP
estandarizadas que sean prácticas y eficientes. (grupo 2). En ambas coloraciones evaluamos
200 espermatozoides con aumento de 1.000x
La Tinción Papanicolaou (TPAP) sigue siendo el según los criterios de la OMS para ME.
método estándar para la evaluación morfológica
de espermatozoides humanos según WHO labo- Comparamos la mediana de los porcen-
ratory manual for the examination and processing of tajes de espermatozoides normales entre
human semen, Sixth Edition (2021). Debido a que los dos grupos mediante una prueba de
la TPAP y otras variantes de coloraciones validadas Mann-Whitney y medimos los tiempos de
contra TPAP son métodos largos y complejos, cada una de las técnicas. Las medianas del
nuestro objetivo fue optimizar la TPAP validan- grupo 1 y 2 fueron de 4%. No encontramos
do una nueva técnica, para simplificar el proce- diferencia significativa entre ambos grupos
so y lograr que sea menos laboriosa y más con un p valor 0,84. La TOPAP solo insume
rápida obteniendo resultados similares. 9 minutos, si la comparamos con TPAP que
insume 32 min, obtuvimos una reducción
Diseñamos un estudio prospectivo-compa- del 71,2 % en el tiempo de proceso.
rativo donde analizamos la ME de 20 mues-
tras de semen de pacientes de 30 a 45 años Con los resultados de este trabajo pode-
que acudieron con pedido de Espermogra- mos validar la técnica de TOPAP contra la
ma al laboratorio, coloreadas con TPAP y coloración estándar (TPAP) para el estudio
con una nueva tinción optimizada de Papa- de la ME, ésta nueva tinción nos permite
nicolaou (TOPAP) puesta a punto en Nanni reducir el tiempo de trabajo, el uso y costo
Laboratorios. Para la validación seguimos la de reactivos, haciendo más eficiente el pro-
guía CLSI EP15-A3 User Verification of Pre- ceso de tinción de espermatozoides en el
cision and Estimation of Bias, 3rd Edition. laboratorio de andrología.

26 INFORME ALAC / Año XXIX / Noviembre 2024